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酶联免疫吸附实验 ELISA

      ELISA检测的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时,固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关, 故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
   
       ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
      

    

      ELISA检测的标本较为广泛,如血清、唾液、尿液、粪便等均可以作为标本检测其中某种抗体或抗原成分。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血液自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
     
     
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